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氫氧化鉀拉絲試驗和新生霉素敏感試驗

發布時間:2019-10-11 來源:中國標準物質網 閱讀:110

1.氫氧化鉀拉絲試驗

(1)原理:革蘭陰性菌的細胞壁在稀堿溶液中容易破裂,釋放出未斷裂的DNA螺旋,使氫氧化鉀菌懸液呈現黏性,可用接種環攪拌后拉出黏液絲,而革蘭陽性菌在稀堿溶液中沒有上述變化。

(2)方法:取1滴40 g/L氫氧化鉀水溶液于潔凈玻片上,取新鮮菌落少量混合均勻,并不斷提拉接種環,觀察是否出現拉絲。

(3)結果判斷:出現拉絲者為陽性,否則為陰性。

2.黏絲試驗

(1)霍亂弧菌與0.5%去氧膽酸鹽溶液混勻,1 min內菌體溶解,懸液由混濁變為清晰,并變黏稠,用接種環挑取時有黏絲形成。

(2)方法:在潔凈載玻片上加0.5%去氧膽酸鹽溶液,與可疑細菌混勻,用接種環挑取,觀察結果。

(3)結果判斷:在1 min內菌懸液由混變清并且黏稠,有黏絲形成為陽性,否則為陰性。

3. CAMP試驗

(1)原理:B群鏈球菌具有“CAMP”因子,能促進葡萄球菌β溶血素的活性,使兩種細菌在劃線處呈現箭頭形透明溶血區。

(2)方法:先用產溶血素的金黃色葡萄球菌在血平板上劃一橫線,再取待檢的鏈球菌與前一劃線做垂直接種,兩者相距0.5~1.0 cm,干35℃孵育18~24 h,觀察結果。

(3)結果判斷:在兩種細菌劃線交界處,出現箭頭形透明溶血區為陽性。

(4)注意事項:被檢菌與金黃色;葡萄球菌劃線之間留出0.5~1.0 cm的距離,不得相接。

4。奧普托欣(Optochin )敏感試驗

(1)原理:Optochin(乙基氫化去甲奎寧cthylhydrocupreine的商品名)可干擾肺炎鏈球菌葉酸的生物合成,抑制該菌的生長,故肺炎鏈球菌對其敏感,而其他鏈球菌對其耐藥。

(2)方法:將待檢的a溶血的鏈球菌均勻涂布在血平板上,貼放Optochin紙片,35℃孵育18~24 h,觀察抑菌環的大小。

(3)結果判斷:抑菌環大于15 mm的為肺炎鏈球菌。

(4)注意事項:①做Optochin敏感實驗的平板不能在二氧化碳環境下培養,因其可使抑菌環縮小;②同一血平板可同時測定幾株菌株,但不要超過4株;③ Optochin紙片可保存于冰箱中,一般可維持9個月。如用已知敏感的肺炎鏈球菌檢測為耐藥時,紙片應廢棄。

5.新生霉素敏感試驗

(1)原理:金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌可被低濃度新生霉素抑制,表現為敏感,而腐生葡萄球菌表現為耐藥。

(2)方法:將待檢菌接種于MH瓊脂平板或血平板上,貼上每片含5 ug新生霉素診斷紙片一張,35℃孵育18~24 h,觀察抑菌環的大小。

(3)結果判斷:抑菌環直徑大于15 min為敏感,不大于15 mm為耐藥。

6.桿菌肽敏感試驗

(1)原理:A群鏈球菌對桿菌肽幾乎全部敏感,而其他群鏈球菌對桿菌肽一般為耐藥。故用以鑒別A群鏈球菌和非A群鏈球菌。

(2)方法:用棉拭子將待檢菌均勻接種于血平板上,貼上每片含0.04 U的桿菌肽紙片一張,放35℃孵育18~24 h,觀察結果。

(3)結果判斷:抑菌環直徑大于10 mm為敏感,不大于10 mm為耐藥。

7. 0/229抑菌試驗

(1)原理:0/129(2,4二氨基-6,7-二異丙基喋啶)能抑制弧菌屬、發光桿菌屬和鄰單胞菌屬細菌生長,而氣單胞菌屬和假單胞菌屬細菌耐藥。

(2)方法:用棉拭子將待檢菌均勻涂布于堿性瓊脂平板上,把每片含10 ug、每片含150 ug兩種含量的0/129紙片貼于其上,放35℃孵育18~24 h,觀察結果。

(3)結果判斷:出現抑菌環者表示敏感,無抑菌環者為耐藥。

(4)注意事項:弧菌屬、鄰單胞菌屬敏感,氣單胞菌屬細菌為耐藥。上述細菌傳染性強危害大,實驗過程中務必做好生物安全工作,或在相應生物安全級別實驗室進行。


關鍵詞:氫氧化鉀 新生霉素

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